色譜柱常見問題問題指南及維護(hù)方法
1、色譜柱污染
    色譜柱污染會引起保留時(shí)間漂移。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可能是：流動相本身，流動相容器，連接管、泵、進(jìn)樣器和儀器密封墊，以及樣品等。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強(qiáng)的組分，就可能使保留時(shí)間漂移。通常樣品中的強(qiáng)保留組分具有較高的分子量，在此情況下，保留時(shí)間漂移的同時(shí)或其后會有反壓的增加?？梢酝ㄟ^使用固相提取等樣品前處理方法來去除樣品基質(zhì)的影響。
避免色譜柱污染*簡單的方法是防患于未然。相比之下，找到問題的所在并設(shè)計(jì)有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強(qiáng)溶劑，但并非所有污染物都可以在流動相中溶解。
使用保護(hù)柱是個(gè)非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時(shí)采用的辦法。

2、色譜柱平衡
    如果我們觀察到保留時(shí)間漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動相完全平衡。通常平衡需要10~20個(gè)柱體積的流動相。但如果在流動相中加入少量添加劑則需要相當(dāng)長的時(shí)間來平衡色譜柱。需要柱子的充分平衡，然后才能對HPLC進(jìn)行檢定。

3、流動相有機(jī)溶劑
HPLC分析總要求使用HPLC純的試劑，關(guān)鍵是兩點(diǎn)：純度高、紫外吸收小。純度高，是希望沒有雜質(zhì)干擾HPLC分析；不會有金屬離子損害純度為99.99%以上的高純度硅膠基質(zhì)。可以通過重蒸分析純?nèi)軇?；或?yàn)V膜過濾，并定期把前置的過濾頭取下，放稀硝酸里清洗，再用純水洗至中性。
流動相有機(jī)溶劑可能影響HPLC的檢測限。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx